Применение технологии трансплантации эмбрионов для повышения оплодотворяемости коров голштинской породы в период теплового стресса
Применение данного направления технологии воспроизводства в мегакомплексе на 6000 коров, позволило повысить показатель Pregnansy Rate в условиях теплового стресса с 13,0 и 11,6% в 2017 и 2018 гг. до 16,6% в 2019 г. Рациональное сочетание использования осеменения коров сексированной и обычной спермой и трансплантации сексированных эмбрионов способствовало росту среднегодового показателя Preg. Rate на 4,1 и 2,0% в сравнении с предшествующими годами.
В настоящее время наибольшие убытки в молочном скотоводстве приносит бесплодие коров, одной из основных причин которого следует считать низкую оплодотворяемость в жаркий сезон года. Проблема теплового стресса является основным сдерживающим фактором эффективности ведения отрасли молочного скотоводства на промышленной основе не только в странах с жарким климатом, но и южных регионах России. В связи с глобальным потеплением актуальность проблемы возрастает для областей с умеренным и континентальным климатом.
В регионах с жарким летом эффективность искусственного осеменения молочных коров в июле-сентябре снижается в 3 и более раз.
Таб.1: Сравнительная характеристика Preg. Rate по годам в период теплового стресса в ООО «Кубанский МТК»
Попытки повысить уровень оплодотворяемости коров при тепловом стрессе путём ночного осеменения, увеличения кратности и дозы введения спермы, применения гормональных препаратов, изменения рациона и прочее, не приводят к успеху. Некоторые предприятия вообще прекращают осеменение коров в период повышенной солнечной радиации. Применение для охлаждения животных спринклеров и вентиляторов увеличивает поедаемость кормов и молочную продуктивность в среднем на 5-10%, что сопряжено с увеличением затрат. Однако, по сообщениям зарубежных исследователей, позитивное влияние данного способа повышения комфорта на оплодотворяемость коров не оказывает.
Тепловой стресс у коров начинается при температурно-влажностном индексе (THI) окружающей среды более 68. Признаками данного вида стресса является:
– 80 и более дыхательных движений в минуту;
– Повышение ректальной температуры до 39,2⁰С;
– Снижение поедаемости корма на 10% и больше;
– Снижение молочной продуктивности на 10% и больше;
Наибольшему негативному воздействию теплового стресса подвергаются новотельные и высокопродуктивные дойные коровы. На оплодотворяемость коров со средней и низкой молочной продуктивностью летняя жара оказывает несколько меньшее влияние (Hansen, 2007). По данным исследований Badinga et al. (1985), у тёлок случного возраста в жаркий сезон года процент стельности снижается на 5-7%.
Низкая фертильность молочных коров в период теплового стресса приводит к целой цепи негативных последствий:
• Скопление большого количества бесплодных коров в октябре-ноябре.
• Высокая фертильность в осенний период и массовый отёл летом.
• Нарушение равномерности круглогодичного отёла и стабильности работы предприятия.
• Увеличение выбытия новотельных коров и новорожденных телят.
• Увеличение кол-ва маститов, ацидозов, снижение качества молока, снижение иммунитета и прочее.
• Большинство тёлок летнего рождения через 24 месяца, каждый год будут телиться в неблагоприятный сезон.
• Увеличение материальных затрат, спермы, ветеринарных препаратов и рабочего времени.
• Низкая эффективность И.О. при тепловом стрессе значительно увеличивает выбытие высокопродуктивных здоровых коров по причине длительного сервис периода и бесплодия.
• Снижение упитанности на 0,5-0,75 балла.
Причиной массового бесплодия коров в период высокой температуры окружающей среды является повреждение яйцеклетки, т.е. значительно снижается её способность к оплодотворению или гибель эмбриона на ранней стадии дробления 1-4 день.
Многочисленными научными исследованиями доказано, что полный цикл созревания фолликула до овуляции составляет около 120 дней. Повышение температурно-влажностного индекса за критический уровень, негативно влияет в течение всего периода на созревание яйцеклетки. Однако наиболее уязвим ооцит в последние 26 дней до овуляции, в период овуляции, дозревания, оплодотворения и стадии дробления эмбриона до 8-16 бластомеров. В дальнейшем, на стадии поздней морулы (6-й день) и бластоцисты (7-9 день) эмбрион резистентен к воздействию теплового стресса.
Принимая во внимание результаты зарубежных научных исследований, в 2018 году нами была проведена апробация технологии трансплантации сексированных эмбрионов коровам-реципиентам в период теплового стресса в производственных условиях мегакомплекса ООО «Кубанский МТК».
Таб.2: Сравнительная эффективность искусственного осеменения и трансплантации сексированных эмбрионов, при тепловом стрессе коров, по результатам научно-производственного опыта
*Пересадка эмбрионов на 7-й день после охоты.
Результаты научно производственного опыта показали значительное преимущество трансплантации эмбрионов коровам-реципиентам над искусственным осеменением в период теплового стресса (таб. 2).
Таб.3: Эффективность пересадок сексированных эмбрионов коровам-реципиентам в различные сезоны года.
Сравнительная характеристика трансплантации эмбрионов коровам-реципиентам в различные сезоны года показывает отсутствие существенного влияния погодных условий на эффективность эмбриопересадок (таб. 3).
Трансплантация сексированных эмбрионов коровам-реципиентам в период теплового стресса позволяет решать не только насущные проблемы борьбы с бесплодием, но и получать в отдалённой перспективе на 40-45% больше тёлок от генетически ценных родительских пар в сравнении с искусственным осеменением традиционной спермой.
Опираясь на позитивные результаты апробации и экономически обоснованную перспективу, было принято решение о внедрение данного направления в производство.
За период с ноября 2018 по апрель 2019 нами было произведено по технологии in vivo и заморожено 1007 сексированных эмбрионов. Донорами эмбрионов являлись поставленные на выбраковку бесплодные после многократного искусственного осеменения коровы, не утратившие воспроизводительную способность. Число дней бесплодия доноров на момент вымывания составил в среднем 422 дня (306-782 дн.).
Таб. 4: Продуктивность коров-доноров по лактациям
Превосходство доноров по продуктивности за 305 дней лактации, в сравнении со сверстницами, составило по 1 лакт.-1896 кг, 2 лакт.- 1632 кг, 3 лакт.-2043 кг, 4 лакт.-1710 кг молока.
Таб. 5: Производство сексированных эмбрионов
По результатам 142 вымываний доноров, не получено качественных эмбрионов в 23 случаях (16,2%). От остальных извлечений получены качественные криопригодные эмбрионы и в зависимости от их числа распределились следующим образом:
Таб.6: Эмбриопродуктивность коров-доноров
Для производства эмбрионов использовалась сексированная сперма 4-х быков. Выход качественных эмбрионов 1 и 2 класса по быкам варьировал от 45,9 до 56,1%. Эмбрионы 3-го класса (удовлетворительные) для криоконсервирования не использовались.
Таб.7: Использование сексированной спермы в производстве эмбрионов
В комфортный сезон года, при условии одинакового процента оплодотворяемости коров двумя методами, затраты спермы на получение одной стельности от эмбриона были в 3 раза меньше, чем от искусственного осеменения.
В период теплового стресса июль-сентябрь, разница по затратам спермодоз на получение стельности методом искусственного осеменения увеличивалась в 5-6 раз в сравнении с эмбриопересадками (5,5 доз против 0,9).
Эмбриопересадки коровам-реципиентам, проводились нехирургическим методом в период максимального проявления теплового стресса у животных. В течение 90 дней пересажено 1007 заморожено-оттаянных сексированных эмбрионов.
Для повышения уровня закладки стельности (Preg. Rate), применялись пересадки сексированных эмбрионов коровам вне зависимости от возраста, числа перегулов от искусственного осеменения и дней бесплодия, и подсадки гиноэмбрионов первотёлкам осемененным сексированной спермой 6-8 дней назад.
Отношение учёных и практиков к вопросу подсадки эмбрионов неоднозначно. Здесь важно определить с какой целью проводятся подсадки и понимать последствия отёлов двойней. Отёл двойней для крупного рогатого скота является нормальным физиологическим явлением. Например, в мясном скотоводстве увеличение количества двоен в стаде повышает рентабельность отрасли, т.к. стоимость телёнка адекватна годовому содержанию коровы.
В молочном скотоводстве, где основная прибыль от молока и рождённой тёлки, необходим дифференцированный подход к технологии подсадки. Лимитирующим фактором применения подсадок является 50% вероятность рождения разнополой двойни при использовании традиционной спермы, в результате чего у женских особей возникает фримартинизм (врождённое бесплодие). При использовании для осеменения коров сексированной спермы и подсадки сексированного эмбриона, вероятность рождения разнополой двойни минимизируется.
Проведение подсадок в комфортный период года экономически менее выгодно, ввиду относительно высокого уровня оплодотворяемости коров при использовании сексированной спермы (35-50%). Однако, в период теплового стресса, для решения общепроизводственных проблем, когда эффективность искусственного осеменения снижается до 12-16%, применение подсадки эмбрионов повышает показатель Conception rate в 3-3,5 раз. При таких условиях вероятность отёлов двойней не будет превышать 5-8%, а количество разнополых двоен до 1 %.
Достоверность происхождения потомства определяется методом генетического анализа путём подтверждения или отрицания родства реципиента и телёнка. Исходя из полученных результатов, автоматически устанавливается отцовство.
Таб.8: Эффективность трансплантации эмбрионов в период теплового стресса коров
В настоящее время большинство руководителей предприятий и инвесторов считают трансплантацию эмбрионов дорогостоящим методом размножения. Однако, при правильной организации технологического процесса, рациональном использовании доноров-эмбрионов и материалов, применение данного метода становится высокорентабельным и доступным для любого аграрного формирования. Как и в любом бизнесе экономическая эффективность зависит от снижения затрат на производство и увеличения количества и качества продукции. Применительно к технологии трансплантации это увеличение количества качественных эмбрионов за процедуру извлечения с минимизацией затрат на их производство и максимально возможный процент стельности после трансплантации реципиентам.
В данном предприятии затраты на производство одного качественного сексированного эмбриона составили 6714 рублей включая медикаменты, гормональные препараты, реактивы, расходные материалы, гонорар исполнителей, сперму, амортизацию помещения и оборудования. Затраты на кормление и содержание доноров отсутствовали, так как коровы состояли в группе на выбраковку, однако являлись дойными (в среднем 19,2 л/сут.). Снижение молочной продуктивности коровы-донора до уровня убыточности её содержания, являлось основанием для сдачи на мясокомбинат.
Таб.9: Сравнительная характеристика затрат на получение стельности
Основной экономический эффект пересадок и подсадок в период теплового стресса состоит в снижении дней бесплодия коров за счёт более высокого уровня стельности, чем при искусственном осеменении и увеличении количества генетически более ценных тёлок, дочерей коров рекордисток стада.
Работа в направлении применения эмбриотрансфера при тепловом стрессе продолжается. К предстоящему летнему сезону, на начало мая, произведено 1111 сексированных эмбрионов. Научный анализ результатов прошлых лет позволил установить факторы способствующие повышению эффективности технологии.
Дуванов Александр, тел. +7 988 356 14 59; e-mail: aleksandr.duvanov2@yandex.ua
Хромов Николай, тел. +7 918 656 78 38; e-mail: hrnk@mail.ru
Дуванов А.В.- ветеринарный врач
Хромов Н.И. - ветеринарный врач
ООО «Кубанский молочно-товарный комплекс», Краснодарский край.